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荧光分光光度计狭缝步长的设置

来源:http://www.run-qee.com/   作者:紫外可见分光光度计    更新日期:2016-10-10 09:16:06    点击:746

荧光分光光度计狭缝步长的设置

 

狭缝的设置:
荧光强度跟很多因素有关,如分子结构、存在状态、溶液浓度或薄膜厚度、温度、选择的激发波长、测试狭缝宽度等因素。荧光强度在不同仪器上的测量值存在大差异,不具有可比性,但是其峰位还是较容易确定的,可以用来判断何种物质。进行荧光定量分析,必须固定一些条件。
狭缝的大小对荧光强度很重要,狭缝大小可根据你所测物质的荧光强度大小作适当的调整。在同一浓度,如荧光强度过大,超过仪器量程,可减小狭缝。但是,需要指出的是,不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度,还要考虑分辨率的问题。对于荧光扫描而言,狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高,但是分辨率随之降低。狭缝决定分辨率,仪器其它结构已经固定(光栅的刻线数、焦距<及综合的线色散系数),狭缝大小就决定分辨率的高低。对于实际使用,狭缝大小需要和测定的峰的半峰宽相匹配,过大,峰就变形了。狭缝大小也决定了光通大小。按照经验数值,狭缝开大1倍,光通量将增大4倍。
步长的设置:
测量的步长小,测量会慢些,好处是图谱细腻些;步长大,测量速度快,谱图就显得粗糙些。步长设置最好小于需要测量最小半峰宽的1/5,因为步长会与分辨率相关的。原则上,步长应小于3倍的狭缝宽度。

 

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