双波长消去法测定复方制剂安痛定中安替比林的含量

A. 实验原理
经典双光束分光光度法中，入射光是同一波长的单色光分别通过吸收池和参比池，得到的信号是相对于参比溶液吸收为零的吸光度。由于吸收池位置、吸收池常数、待测溶液和参比溶液之间浑浊度、溶液组成等因素的差别影响，可能引起较大误差。双波长分光光度法克服了经典单波长分光光度法的缺点。在双波长分光光度法中，从光源发射出来的光线分别经过两个单色器（光栅）后，得到两束具有不同波长的弹色光，利用斩光器使这两束单色光交替通过同一待测溶液，得到的信号是待测溶液对两种单色光的吸光度差值。可测定浑浊溶液，也可测定吸收光谱重叠的混合组分。
安痛定注射液中主要成分为氨基比林、安替比林和巴比妥。安替比林检测的紫外分光光度定量方法有双波长消去法、系数倍率法、最小二乘法、卡尔曼滤波分光光度法等。本实验采用双波长消去法测定其中安替比林组分的含量。
安痛定的成分组成：每2 mL内含氨基比林0.100 g，巴比妥0.018 g，安替比林0.040 g。
B. 仪器、试剂
1．仪器
UV-2450紫外可见分光光度计：电子天平。
石英吸收池；容量瓶(100 mL、2000 mL);吸量管(1.0 mL)。
2．试剂
安替比林（纯品）；氨基比林（纯品）：巴比妥（纯品）：盐酪（分析纯）：安痛定注射液。
C. 实验步骤
1．溶液配制
分别取安替比林、氨基比林、巴比妥纯品，准确称量，用0.1 mol·L^-1盐酸准确配制100 mL浓度为0.015 mg·mL^-1的溶液。
2．仪器自检
接通电源，仪器预热20 min，然后进行自检；联机自检结束，仪器进入测试状态。
3．测试步骤
(1)在应用程序菜单下选择“定性测试”，单击。
(2)设置扫描参数：通过扫描参数设置操作界面，设置扫描方式(A)、扫描次数(1)、扫描精度(1 nm)、起始波长(220 nm)、终止波长(400 nm)、坐标下限（-0.1）和坐标上限(3)，单击“确定”。
(3)建立基线：在光度计的样品槽内放入参比溶液（0.1 mol·L^-1盐酸），在“附属功能”菜单下单击“建立仪器基线”（或单击界面的“Scan Baseline”），在对话框内输入起始波长(220 nm)和终止波长(400 nm)，单击“确定”。
(4)在定性分析图谱操作界面，选择扫描方式吸光度和扫描信道1，单击。
(5)λ1的测定：取安替比林纯品，准确称量，用0.1 mol·L^-1盐酸准确配制100 mL含安替比林12～1.3 mg的溶液，计算百分浓度值（准确至相对误差小于1%）。用盐酸作参比溶液调“0”和“100%”，然后把配制好的安替比林溶液放入样品槽，对准光路，单击“扫描”，得安替比林的扫描图谱，取波峰处为λ1。单击“数据表”，记入此处Ala和λ1值。
(6)λ2的测定：取氨基比林纯品，用0.1 mol·L^-1盐酸配制成浓度为0.015 mg·mL^-1的溶液（不必准确）。选择扫描信道2，单击，把配制好的氨基比林溶液放入样品槽，对准光路，单击“扫描”，得氨基比林的扫描图谱。在“可选通道”选通道1，单击“图谱合”，得安替比林和氨基比林的组合图谱。以λ1处作纵轴的平行线与氨基比林图谱有交叉点，单击“数据表”，记入此交叉点的爿A1b值。再从数据表中找出与A1b值相等或近似相等的A2b，此处的波长作为λ2。
(7)安替比林ΔA的测定：选择扫描信道1，单击，再单击“数据表”，查找λ2处的安替比林的吸光度值A2a，求出ΔA。根据公式Δε=ΔA/c计算出Δε。
(8)取巴比妥纯品，用0.1 mol·L^-1盐酸配制成浓度为0.015 mg·mL^-1的溶液（不必准确）。选择扫描信道3，单击，把配制好的溶液放入样品槽，对准光路，单击“扫描”，巴比妥的扫描图谱。在“可选通道”选通道2，单击“图谱组合”，得安替比林、氨基林和巴比妥的组合图谱，观察巴比妥在所选波长范围内的吸收情况。
(9)安痛定注射液中安替比林的测定：准确吸取样品1.00毗，用0.1 mol·L^-1盐酸准确稀释2000倍，含安替比林约0.002%。在λ1和λ2处测定吸光度，计算出其ΔA值，并计算其浓度：c=ΔA/Δε，再将浓度换成样品的含量与标示量的比值。
(10)了解软件的其他功能，记录相关数据、打印图谱；结束仪器操作。
D. 注意事项
(1)待测试样溶液浓度除已有注明外，其吸收度以0.3～0.7为宜。
(2)取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，盛装样品以池体的4/5为度，使用挥性溶液时应加盖。透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂i或水冲洗干净，晾干防尘保存。
(3)选用仪器的狭缝宽度应小于待测样品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低。对于大部分待测样品，可以使用2 nm狭缝宽度。

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