紫外可见分光光度计的分类
紫外可见分光光度计的类型很多,但可归纳为三种类型,即单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。
1.单光束分光光度计
单光束分光光度计是紫外可见分光光度计的经典结构。经单色器分光后的一束平行光轮流通过参比溶液和样品溶液,进行吸光度的测定。这种类型的分光光度计结构简单,操作方便,容易维修,适用于常规分析。
2.双光束分光光度计
双光束分光光度计的光源发出的连续辐射经单色器分后经反射镜分解为强度相等的两束光,一束通过参比池,另一束通过吸收池。光度计能自动比较两束光的强度,比值即为试样的透射比。此数值经对数变换后转换成吸光度,并作为波长的函数记录下来。
双光束分光光度计一般都能自动记录吸收光谱曲线。由于两束光同时分别通过参比池和吸收池,因此还能自动消除光源强度变化引起的误差。
3.双波长分光光度计
由同一光源发出的光被分成两束,分别经过两个单色器,得到两束不同波长的单色光。再利用斩光器使两束光以一定的频率交替照射同一吸收池,信号经过检测器检测与处理后,由显示器显示出两个波长处的吸光度差值。
双波长分光光度计适用于多组分混合物、浑浊试样(如生物组织液)的分析,以及存在背景干扰或共存组分吸收干扰样品的分析测试。双波长分光光度法能提高灵敏度和选择性,还可以获得导数光谱。如果在两波长处分别记录吸光度随时间变化的曲线,还可以进行化学反应动力学研究。
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