紫外可见分光光度法定量分析

紫外可见分光光度法常用于定量分析，根据测量波长的范围可分为可见光分光光度法和紫外分光光度法。前者用于有色物质的测定，后者用于有紫外吸收的物质的测定，两者的测定原理和步骤相同，通过测定溶液对一定波长入射光的吸光度，依据朗伯—比尔定律，就可以求出溶液中物质的浓度或含量。
1．单组分样品的分析
若样品为单组分的，且遵守吸收定律，只要测出被测物质的最大吸收波长λmax，就可在此波长下，选用适当的参比溶液，测量溶液的吸光度，再用标准曲线法或比较法求得分析结果。
2．多组分样品的分析
多组分是指在被测溶液中含有两个或两个以上的吸光组分。进行多组分混合物定量分析的依据是吸光度具有加和性，假设样品中同时存在两个吸光组分x和y，需要先测定两种组分的吸收曲线，对比其最大吸收波长，并计算出对应的吸光系数。它们的吸收光谱一般有以下两种情况：
①吸收光谱曲线不重叠。见图1 -16(a)，若各组分的吸收曲线互不重叠，表明两组分互不干扰，则可在各自最大吸收波长λ1和λ2处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。

②吸收曲线互有重叠。见图1 -16(b)，若各组分的吸收曲线互有重叠，表明两组分测定时有相互干扰，在这种情况下，需要首先测定纯物质x和y分别在λ1和λ2处的吸光系数，再分别测定溶液在λ1和λ2处的吸光度，然后根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。
用这种方够虽可以用于溶液中两个或两个以上的吸光组分的同时测定，但组分数n>3结果误差增大。近年来由于电子计算机的广泛应用，多组分的各种计算方法得到快速发展，提供了一种快速分析的服务。
3．高含量组分的测定-示差法
普通分光光度法一般只适于测定微量组分(10^-2～10^-64 mol/L)，当待测组分含量较高时将产生较大的误差，需采用示差法。该方法适用于分析τ%<10的组分。
方法是提高入射光强度，并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。
4．双波长分光光度法
不需空白溶液作参比，但需要两个单色器获得两束单色光，双波长分光光度法适用于混合物和浑浊试样的测定。由于采用同一个吸收池，消除了参比液和吸收池差异的影响，提高了方法的准确度。

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